Rodio se 339. godine u Trieru, u obitelji visokoga državnog službenika rimskog carstva. Izvrsno je izobražen te su mu povjeravane političke službe. Tako je u Milanu vršio službu konzula.
Postao je katekumen te se spremao na krštenje. Smrću milanskog biskupa za njegova nasljednika je aklamacijom izabran Ambrozije. Primio je krštenje te je posvećen za biskupa 7. prosinca 374. godine. Bio je vrstan propovjednik kojeg su slušali mnogi uglednici, među njima i sv. Augustin kojeg je krstio. Bio je teološki pisac, pjesnik pa i skladatelj.
"Ambrozijanska liturgija" je u bogoslužju Milanske biskupije još živa barem djelomično. Prvi je za euharistiju upotrijebio izraz "misa".
Umro je 397. godine te je pokopan u milanskoj bazilici.
